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WSP-5（H2S Probe）說(shuō)明：
硫化氫 (H2S) 是一種重要的氣體介質(zhì)，如一氧化氮，對(duì)哺乳動(dòng)物的免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和肺系統(tǒng)具有顯著影響。WSP-5（H2S Probe,1593024-78-2）是一種新型熒光探針，WSP-5 用于硫化氫 (H2S) 的開(kāi)啟熒光探針，1 在與 H2S 反應(yīng)時(shí)，WSP-5 會(huì)釋放出熒光團(tuán)，該熒光團(tuán)的激發(fā)/發(fā)射最大值分別為 502/525 nm。 與 WSP-1 相比，WSP-5 具有更快的開(kāi)啟速率和對(duì) H2S 更靈敏。

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使用方法
儲(chǔ)存液制備：將低溫保存的產(chǎn)品從冰箱取出，置于室溫回溫至少20min，低速離心3-5min之后內(nèi)加入適量無(wú)水DMSO充分溶解成15M儲(chǔ)存液(比如，1mg WSP-5(Mw: 591.7)加81ulDMSO)或更低濃度的儲(chǔ)存液，請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況來(lái)調(diào)整，按照單次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，至少3個(gè)月穩(wěn)定。
工作濃度：正式實(shí)驗(yàn)前，取15mM或其他濃度儲(chǔ)存液用適當(dāng)緩中液或培養(yǎng)基稀釋到所需工作濃度即可，具體的工作濃度請(qǐng)參考文獻(xiàn)或根據(jù)自身實(shí)需求來(lái)進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整，參考下方些實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，來(lái)自公開(kāi)文獻(xiàn)，僅作參考
應(yīng)用示例1: Hela細(xì)胞用DMEM+10% FBS培養(yǎng)2天，成像前一天，細(xì)胞轉(zhuǎn)移到24孔內(nèi)，檢測(cè)前，貼壁細(xì)胞用FBS-free DMEM清洗一遍，對(duì)于胞內(nèi)H2S成像，細(xì)胞用含WSP-5 (50uM) 的FBS-free DMEM于37℃孵育30min,用PBS (pH 7.4)清洗取出多余探針，然后細(xì)胞用溶于PBS bufer (pH 7.4,100uM CTAB) 的NaHS (100uM) 孵育30min，用PBS (pH 7.4) 清洗細(xì)胞3遍后，熒光顯微成像 (490nm激發(fā)，綠色通道)。: Peng B et al Nucleophlic substitution-cyclization based fuorescent probes for hydrogen sulfide detection and bioimaging, Chemistry 2014Jan 20:20(4):1010-6.
應(yīng)用示例2: SHSY5Y和U87MG用待研究的緩釋天然硫化氫供體HBITC 40,60,80 uM) 或等體積含DMSO的培養(yǎng)基育，之后細(xì)胞用硫化氫探針WSP-5(50μM)CTAB (100μM in PBS)避光解育20min,用PBS清洗后,熒光顯微成像檢測(cè)，文獻(xiàn)來(lái)源: Jurkowska H et al.New aspects ofantiproliferative activity oi4-hydroxybenzyl isothiocyanate, a natural H2S-donor Amino Acids. 2018 Jun;50(6):699-709.
案例：

?Fluorescence images of H 2 S in HeLa cells using WSP4 and WSP5. (a-f) Cells on 24-well plate were incubated with WSP4 (30 mm) for 30 min, then washed and subjected to different treatments: (a,b) Control (no NaHS was added); (c,d) treated with 30 mm NaHS; (e,f) treated with 60 mm NaHS. (g-l) Cells on 24-well plate were incubated with WSP5 (50 mm) for 30 min, then washed and subjected to different treatments: (g,h) Control (no NaHS was added); (i,j) treated with 50 mm NaHS; (k,l) treated with 100 mm NaHS. Scale bar: 100 nm.

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