什么是Protein Ladder or Protein Marker?
Release Time:2022-09-19什么是Protein Ladder or Protein Marker?
Protein Ladder用于實驗中以估計感興趣的蛋白質(zhì)的大小,并使用凝膠電泳解決。它們也被稱為蛋白質(zhì)標(biāo)記、蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)或蛋白質(zhì)分子量標(biāo)記。
Protein Ladder包含定義或已知分子量的高度純化蛋白質(zhì)的混合物。 它們在蛋白質(zhì)印跡中的電泳轉(zhuǎn)移過程中充當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)的參考點。
它們在生命科學(xué)和生物化學(xué)實驗室中廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)分析,例如了解蛋白質(zhì)的功能作用和機制以及蛋白質(zhì)發(fā)現(xiàn)。
本文介紹了蛋白質(zhì)梯的工作機制以及在生物和化學(xué)分析中廣泛使用的幾種不同類型。
Protein Ladders的工作原理?
Protein Ladders用于估計凝膠電泳過程中蛋白質(zhì)分子的大致大小。
構(gòu)成Protein Ladders的純化蛋白質(zhì)混合物在凝膠中移動,并根據(jù)它們的分子量順序排列,即從最大分子量(最靠近上樣孔)到最低分子量(離上樣孔最遠(yuǎn))。
因為:
※ 較小尺寸的蛋白質(zhì)可以很容易地穿過凝膠基質(zhì)的小孔,并遠(yuǎn)離樣品加載孔,即向正極移動。
※ 較大尺寸的蛋白質(zhì)通過基質(zhì)的小孔的運動受到阻礙,導(dǎo)致它們更靠近樣品加載孔,即更靠近負(fù)極。
Protein Ladders的常見類型:
※ 預(yù)染的天然Protein Ladders:當(dāng)用一種或多種顏色染色時會產(chǎn)生寬條帶,并顯示與每種蛋白質(zhì)結(jié)合的染料的數(shù)量和位置的可變性。 研究人員通常不喜歡這些,因為它們往往會產(chǎn)生模糊的寬帶。
※ 預(yù)染重組蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn):這些是研究使用的高度優(yōu)選的分子量標(biāo)準(zhǔn)。 它們經(jīng)過精心設(shè)計,可以產(chǎn)生清晰、均勻分布的蛋白質(zhì),預(yù)染不同的顏色,從而更容易和更簡單地估計蛋白質(zhì)的大致分子量。
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大多數(shù)商業(yè)預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)可用作具有 10-12 種預(yù)染蛋白的三色蛋白標(biāo)準(zhǔn)品。 它們以加載緩沖液的形式提供,以便直接加載到凝膠泳道中。