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EDTA(二鈉,溶液配制,溶解度,作用)
Release Time：2022-10-06EDTA作用：
※ EDTA是一種化學(xué)螯合劑，可以螯合二價金屬離子，如Ca2+和Mg2+。
※ EDTA溶液也稱為Versene溶液。由于Ca2+和Mg2+是細胞膜的重要組成部分，具有凝集細胞的功能，EDTA可以破壞細胞之間的連接，促進細胞分裂為單個細胞。
※ EDTA毒性較小，價格低廉，使用方便，并且不會破壞細胞表面分子。
※ EDTA只與Ca2+和Mg2+結(jié)合，因此適用于需要檢測細胞表面分子的細胞消化。它還經(jīng)常與胰蛋白酶溶液按一定比例混合。
※ EDTA產(chǎn)品：液體濃度：0.02%pH:7.2-7.4酚紅：陰性溶劑：10mM PBS EDTA:0.2g/L儲存：2-8°C裝運：RT有效期：18個月。
EDTA溶液配制步驟：
如果你想配制1L，0.2%EDTA溶液，取800ml。
1. 添加EDTA.2Na。2H2O（見表）。
2. 將燒杯放在帶有磁性顆粒的磁力攪拌器上。保持pH探針監(jiān)測pH值。
3. 加入75%的NaOH顆粒（以20g/L為基礎(chǔ)計算粗制量，制成0.5M）。
4. 讓氫氧化鈉完全溶解。同時檢查二水EDTA二鈉的溶解情況。
5. 依次加入其余的氫氧化鈉顆粒。不要試圖一次添加大量內(nèi)容。你可能會超過pH值。
6. EDTA完全溶解后，檢查pH值。必要時使用HCl。
7. 將溶液轉(zhuǎn)移到量筒中并調(diào)整體積。
8. 通過過濾器滅菌（0.22微米）或高壓滅菌進行滅菌。
| 摩爾濃度 | 100 ml | 250 ml | 500 ml | 1000 ml |
|---|---|---|---|---|
| 100 mM | 3.72 g | 9.30 g | 18.61 g | 37.22 g |
| 0.25 M | 9.31 g | 23.26 g | 46.53 g | 93.06 g |
| 0.5 M | 18.61 g | 46.53 g | 93.06 g | 186.12 g |
EDTA用途：
1. 在化學(xué)水平上，EDTA 與金屬離子形成配位化合物，從而使它們失活。
2. 生物化學(xué)家使用EDTA用于提高或降低酶的活性。
3. 無機化學(xué)家使用它作為化學(xué)緩沖液。
4. EDTA（鈉鈣EDTA）的變體用于治療鉛（Pb）和汞（Hg）中毒。
5. EDTA還可用作加工食品和化妝品的防腐劑。
6. TAE、TBE、DNA負載染料、Tris-EDTA、胰蛋白酶EDTA的成分。
EDAT用途的案例：
1. 提高或降低酶的活性案例：
DNA聚合酶的活性需要Mg2+。溶液中存在EDTA會導(dǎo)致Mg2+的隔離。這最終使Mg2+無法用于DNA聚合酶，從而降低其活性。EDTA的螯合性能在DNA分離時是一個優(yōu)勢（降低DNA酶活性以防止DNA降解），而在PCR中是一個劣勢（需要DNA聚合酶活性）。
2. 提高酶的活性案例：
胰蛋白酶EDTA用于通過破壞細胞間基質(zhì)，從貼壁細胞培養(yǎng)物中制備單細胞懸浮液（去除電鍍細胞）。鈣和鎂離子可增強細胞間粘附。胰蛋白酶混合物中存在EDTA，可以隔離增強基質(zhì)的離子。捕獲這些離子會削弱相互作用并促進胰蛋白酶消化。
3. EDTA溶解度.
對于大多數(shù)應(yīng)用，EDTA.2Na。使用pH 8.0的2H2O溶液。EDTA在中性pH下的溶解度很低，因此必須將溶劑（H2O）的pH值提高到8才能增加溶解度。
用于制備0.5M EDTA.2Na。2H2O溶液，大約需要20g NaOH。您可以以顆粒形式添加NaOH或10N NaOH溶液。如果pH過高，則使用HCl。
