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支原體去除劑的使用方法,工作濃度,對(duì)細(xì)胞有影響嗎?

Release Time:2022-10-13

支原體去除劑的工作濃度:
1. 將支原體清除劑添加到被支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物中,濃度建議為5µg/ml,并培養(yǎng)1周;
2. 只有當(dāng)推薦濃度對(duì)去除支原體無效時(shí),才能將支原體去除劑濃度提高至10µg/ml;
3. 對(duì)于培養(yǎng)基更換或培養(yǎng)物轉(zhuǎn)移(傳代),使用含有相同濃度支原體清除劑的培養(yǎng)基;
4. 在不使用支原體清除劑的情況下轉(zhuǎn)移細(xì)胞培養(yǎng)物數(shù)次,并確認(rèn)污染支原體沒有再生。
支原體去除劑產(chǎn)品HCQ001000


支原體清除劑注意事項(xiàng)(細(xì)胞影響):

1. 如果不能去除血清或胰蛋白酶中的支原體,可以將濃度為5µg/ml的支原體清除劑添加到培養(yǎng)基中,以防止接觸這些產(chǎn)品的細(xì)胞培養(yǎng)物受到污染;
2. 支原體清除劑自發(fā)貨之日起保質(zhì)期長(zhǎng)達(dá)5年,在室溫下也很穩(wěn)定,但應(yīng)避光以防分解;
3. 支原體清除劑的細(xì)胞毒性較低,但是,當(dāng)用支原體去除劑處理時(shí),高度受支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物可能會(huì)表現(xiàn)出細(xì)胞特性的改變或?qū)?xì)胞毒性抗生素的敏感性,因此,在這些情況下,建議在處理后檢查預(yù)期的細(xì)胞特性。
支原體清除劑案例數(shù)據(jù)
下表顯示感染水平、細(xì)胞類型和支原體菌株可能會(huì)影響特定結(jié)果。我們鼓勵(lì)研究人員將此數(shù)據(jù)作為有用的指南,以指示其特定細(xì)胞系和支原體菌株所需的有效支原體清除劑濃度。
支原體清除效果-自發(fā)性感染
MRA濃度 (ug/ml) 天數(shù)
    0 7 14 21
Human-derived cell-A 3.9 + - - -
  2 + - - -
  1 + - + +
  0 + + + +
Human-derived cell-B 7.8 + - - -
  3.9 + - - -
  2 + - - -
  1 + + + +
  0 + + + +
(+)=支原體陽(yáng)性,(-)=支形體陰性,(天*)=培養(yǎng)階段的支原體狀態(tài)(天)。
參考文獻(xiàn):

1. Molla Kazemiha V. et al. 2011. Efficiency of Plasmocin on various mammalian cell lines infected by mollicutes in comparison with commonly used antibiotics in cell cultures: a local experience. Cytotechnology. Dec; 63(6):609-20.
2. Uphoff C. C. et al., 2012. Treatment of mycoplasma contamination in cell cultures with Plasmocin. J Biomed Biotechnol. 2012:267678.
3. Rongvaux A. et al., 2014. Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model. Nat Biotechnol. 32(4):364-72.
4. Baronti C. et al., 2013. Mycoplasma removal: simple curative methods for viral supernatants. J Virol Methods. 187(2):234-7.
5. Deng F. et al. 2012. Generation of induced pluripotent stem cells from human Tenon's capsule fibroblasts. Mol Vis. 18:2871-81.
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