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乙二醛化RNA的瓊脂糖凝膠電泳
Release Time：2022-10-13RNA的制備：
1. 應(yīng)該確保RNA在無鹽狀態(tài)下：用70% 冰涼的 乙醇（EtOH） 清洗至少兩次。如果你仍然可以觀察到一個(gè)相當(dāng)大的鹽顆粒，然后用冰涼70%EtOH重新沉淀清洗。
2. 在室溫下風(fēng)干顆粒至少30分鐘。
3. 在3.7 ml H2O（最多20 mg）中重新懸浮RNA顆粒。
然后添加：
※ 2.7 ml 6 M乙二醛
※ 8.0毫升二甲基亞砜
※ 1.6毫升0.1M NaH2PO4（乙二醛應(yīng)在任何類型的離子交換樹脂上去離子，如BIOFOUNT 提供的樹脂。將等分樣品儲(chǔ)存在-20℃的密封管中。）
4. 在50℃條件下培養(yǎng)1小時(shí)。
5. 加入5g 50%甘油、0.01%溴酚藍(lán)、0.01%二甲苯氰醇FF溶液。
凝膠的制備：
1. pH 6.8條件下，在10mM NaH2PO4溶液中準(zhǔn)備1.4%的瓊脂糖凝膠。溶解瓊脂糖后，允許冷卻至70℃，然后添加 SDS 至0.1%最終濃度；
2. 凝膠在125V 條件下運(yùn)行3小時(shí)。凝膠運(yùn)行期間，緩沖液必須循環(huán)。
RNA可視化：
1. 將凝膠浸泡在50mM NaOH溶液中，輕輕搖晃大約20分鐘。
2. 將凝膠浸泡在 TBE 或TAE+1 ug/ml EtBr 溶液中，輕輕搖晃大約20分鐘。
3. 在紫外燈條件下拍照。
