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帶你學習染色體C顯帶技術

Release Time:2020-07-20

一、染色體C顯帶技術簡介:
染色體C顯帶是染色體標本用強堿(NaOH或Ba(OH))進行熱處理后,Giemsa將著絲粒周圍的區(qū)域和異染色質(zhì)區(qū)域染色為深色,而染色體兩臂的常染色質(zhì)部分只有亮色輪廓,這是一種特殊的條帶化方法,不顯示染色體上的條帶,主要顯示著絲粒區(qū)域和異染色質(zhì)區(qū)域的變化,稱為著絲粒異染色質(zhì)法,因此簡稱為C波段,常用的是CBG方法(使用Giemsa的氫氧化鋇進行C波段分析),然后用Ba(OH)?處理并用Giemsa染色。

二、染色體C顯帶技術所需材料及試劑:
NaOH、Ba(OH)?、HClSSC、Giemsa稀釋液
三、染色體C顯帶技術的實驗步驟
1.首先制膜和烘烤與G帶技術相同(65°C,2小時)。
2.染色體標本在室溫下用0.1 N HCl水解15分鐘,然后用蒸餾水沖洗。
3. 2%Ba(OH)?,在65℃下處理10分鐘,然后用蒸餾水沖洗。
4. 2×SSC,65°C放置1小時。
5.洗滌和冷卻后,用1:10 Giemsa稀釋液染色7分鐘。
6.沖洗后,使其干燥并在顯微鏡下檢查。
7.核型分析:通過低倍顯微鏡選擇標本,然后更換為油鏡,以分析染色體上著絲粒和異染色質(zhì)區(qū)域的變化,選擇典型的分裂相以放大并在顯微照片后打印,然后根據(jù)C波段分析標準進行剪切和粘貼。

四、染色體C顯帶技術的注意事項:
1.染色體制備后可立即進行C顯帶。膠片的年齡不能太長,會影響C波段的質(zhì)量。
2.染色體標本的質(zhì)量較好,并且在分裂相周圍無細胞質(zhì)等背景時,不需要鹽酸水解。

五、染色體C顯帶技術實驗所需試劑清單:
序列 產(chǎn)品名 貨號 CAS 備注
1 NaOH                                  JT8650 1310-73-2  
2 Ba(OH)? WSH40129 17194-00-2  
3 HCl BD0190 7647-01-0  
4 SSC緩沖液 HC1632    
5 吉氏色素 SX0115 51811-82-6  
以上為染色體C顯帶技術需要的緩沖液和生物化學類試劑。

 
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